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    山區(qū)飼草飼料資源豐富，羊能充分利用本地荒山草坡和農(nóng)作物秸稈資源，將青粗飼料轉(zhuǎn)換為畜產(chǎn)品，而且能夠減少農(nóng)作物秸稈焚燒引起的空氣污染。二是，山區(qū)遠(yuǎn)離城市和村莊，可以形成一個(gè)天然的防疫屏障，減少口蹄疫、小反芻獸疫等傳染病的感染機(jī)會(huì)；另外，山區(qū)的土地承包費(fèi)用比較低，可以利用這些土地生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)粗飼料，飼養(yǎng)成本比較低。但由于繁殖管理跟不上去，包括沒(méi)有進(jìn)行有效的早期妊娠診斷，沒(méi)有將妊娠母羊、未妊娠母羊以及公羊分圈飼養(yǎng)，沒(méi)有將妊娠母區(qū)別對(duì)待，使得妊娠母羊早期流產(chǎn)，產(chǎn)羔間隔延長(zhǎng)，從而降低了肉羊養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。本項(xiàng)目針對(duì)山區(qū)肉羊養(yǎng)殖過(guò)程中存在的配種受胎率低和產(chǎn)羔率低等問(wèn)題，以邯鄲西部山區(qū)的小尾寒羊?yàn)樵囼?yàn)材料，就肉羊高效繁殖的關(guān)鍵技術(shù)（主要包括山區(qū)肉羊人工授精技術(shù)和早期妊娠對(duì)綿羊淋巴結(jié)和脾臟免疫調(diào)節(jié)），進(jìn)行示范與推廣，以此帶動(dòng)我省山區(qū)肉羊的可持續(xù)發(fā)展，提高飼養(yǎng)肉羊的經(jīng)濟(jì)效益。

    本項(xiàng)目通過(guò)分子檢測(cè)發(fā)現(xiàn)：（1）早期妊娠引起分子量為80 kDa的孕激素受體在綿羊脾臟高表達(dá)。（2）在妊娠16天綿羊脾臟，分子量為22kDa和25kDa的PIBF兩種亞型顯著高于其它組。（3）早期妊娠引起綿羊脾臟和淋巴結(jié)表達(dá)IL-10增加。上述發(fā)現(xiàn)為綿羊早期妊娠免疫抑制形成的機(jī)理提供了理論支持，同時(shí)也為提高肉羊繁殖率提供理論支持。 杜泊綿羊原產(chǎn)于南非，因其適應(yīng)性強(qiáng)、早期生長(zhǎng)發(fā)育快、胴體質(zhì)量好而聞名。杜泊綿羊是改良和提高當(dāng)?shù)鼐d羊肉用生產(chǎn)性能的優(yōu)良終端父系，特別是利用杜泊綿羊作父本，小尾寒羊作母本進(jìn)行商品肉羊生產(chǎn)，充分利用杜泊綿羊的肉用性能和小尾寒羊的多羔性，提高養(yǎng)羊業(yè)的效益。綿羊人工授精可以明顯提高種公羊的利用率。但是，精液稀釋液的不同會(huì)直接影響受胎率。本項(xiàng)目發(fā)現(xiàn)：采用Tris+糖的稀釋液稀釋公羊精液比傳統(tǒng)的檸檬酸鈉或檸檬酸鈉+糖，可以提高不返情率15.38%，提高受胎率10.77%。在短時(shí)間室溫保存后，精子的活率還可以滿足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技術(shù)的推廣。

    本項(xiàng)目研究發(fā)現(xiàn)，在早期妊娠綿羊脾臟，TNF-β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-10上調(diào)表達(dá)，但是，IFN-γ在妊娠后第13和16天表達(dá)量下降。本項(xiàng)目研究還發(fā)現(xiàn)，在妊娠第13或16天綿羊淋巴結(jié)中Th1和Th2細(xì)胞因子的表達(dá)最高。此外，和未妊娠母羊相比，妊娠第25天綿羊淋巴結(jié)中TNF-β和IL-2表達(dá)下降，IL-5和IL-10表達(dá)量增加。妊娠第25天綿羊淋巴結(jié)和未妊娠母羊相比，IFN-γ、IL-4和IL-6的表達(dá)無(wú)顯著性差異。因此，我們推測(cè)早期妊娠可以調(diào)節(jié)淋巴結(jié)Th1和Th2細(xì)胞因子的產(chǎn)生，這對(duì)于綿羊正常妊娠是必不可少的。
經(jīng)教育部燕山大學(xué)科技查新工作站科技查新，三個(gè)查新點(diǎn)：（1）早期妊娠引起分子量為80 kDa的孕激素受體在綿羊脾臟高表達(dá)。（2）在妊娠16天綿羊脾臟，分子量為22kDa和25kDa的PIBF兩種亞型顯著高于其它組。（3）早期妊娠引起綿羊脾臟和淋巴結(jié)表達(dá)IL-10增加。結(jié)論為：“目前國(guó)內(nèi)、外文獻(xiàn)未見(jiàn)與本課題完全相同或相似的文獻(xiàn)報(bào)道”。以上說(shuō)明本成果具有很高的技術(shù)創(chuàng)新性和獨(dú)占性。

    本項(xiàng)目分析了早期妊娠對(duì)綿羊脾臟和淋巴結(jié)表達(dá) Th1（IL-2、IFN-γ、TNF-β）和 Th2（IL-4、IL-5、IL-6和IL-10）細(xì)胞因子的影響，以便了解早期妊娠對(duì)綿羊母體脾臟和淋巴結(jié)免疫調(diào)節(jié)的作用機(jī)制。同時(shí)，研究發(fā)現(xiàn)，利用Tris+糖的公羊精液稀釋液，可以將公羊精液在室溫條件下短時(shí)間保存，精子的活率還可以滿足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技術(shù)的推廣。通過(guò)制定了肉羊繁殖標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)規(guī)范，有利于規(guī)范肉羊繁殖人員的技術(shù)操作，進(jìn)一步提高肉羊繁殖率，杜絕人為因素的影響，更好地服務(wù)于肉羊生產(chǎn)。在鑫紅種羊養(yǎng)殖有限公司和磁縣均富養(yǎng)殖場(chǎng)兩個(gè)廠子推廣應(yīng)用，證實(shí)本項(xiàng)目成果可以提高肉羊人工授精妊娠率9%，增加產(chǎn)羔率10%。計(jì)劃首先在3個(gè)以上肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)推廣應(yīng)用該技術(shù)。

    本項(xiàng)目有強(qiáng)的技術(shù)共性，可跨行業(yè)推廣和擴(kuò)散，具有可持續(xù)發(fā)展性，本成果不僅可以應(yīng)用于山區(qū)的肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)，而且還可以廣泛應(yīng)用于平原和牧區(qū)的肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)，應(yīng)用范圍廣泛。本項(xiàng)目發(fā)現(xiàn)妊娠第16天至第25天母羊脾臟PGR和PIBF mRNA表達(dá)降低，妊娠第25天綿羊脾臟PGR80和PGR43表達(dá)明顯增加，但妊娠第25天時(shí)26 kDa亞型PGR和22 kDa的PIBF變異體幾乎不表達(dá)。免疫組化結(jié)果表明PGR和PIBF蛋白定位在脾臟的莢膜、小梁和脾索。此外，研究還發(fā)現(xiàn)，在早期妊娠綿羊脾臟，TNF-β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-10上調(diào)表達(dá)，但是，IFN-γ在妊娠后第13和16天表達(dá)量下降。另外，IFN-γ和IL-6主要在脾臟莢膜、小梁和脾索中表達(dá)。同時(shí)，研究表明，Tris+糖的精液稀釋液，可以將精液在室溫條件下短時(shí)間保存，精子的活率還可以滿足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技術(shù)的推廣。

    肉羊妊娠早期淋巴結(jié)和脾臟Th1和Th1相關(guān)基因的表達(dá)，直接與早期胚胎丟失相關(guān)，本項(xiàng)目突破了傳統(tǒng)的觀點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)在妊娠早期，綿羊脾臟的孕激素受體和孕酮誘導(dǎo)阻斷因子，以及脾臟和淋巴結(jié)的Th1和Th2細(xì)胞因子的表達(dá)發(fā)生改變。這為綿羊早期妊娠免疫抑制形成的機(jī)理提供了理論支持，同時(shí)也為提高肉羊繁殖率提供理論支持。本項(xiàng)目的研究成果不僅可以應(yīng)用于肉羊方面的相關(guān)研究和技術(shù)推廣，也可以推廣應(yīng)用到其它動(dòng)物和人類(lèi)的相關(guān)研究。另外，采用Tris+糖的稀釋液稀釋公羊精液，在短時(shí)間室溫保存后，精子的活率還可以滿足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技術(shù)的推廣。此外，本項(xiàng)目制定了肉羊繁殖標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)規(guī)范，規(guī)范了肉羊繁殖人員的技術(shù)操作，可以進(jìn)一步提高肉羊繁殖率，杜絕人為因素的影響，提高肉羊飼養(yǎng)的經(jīng)濟(jì)效益。

    目前，山區(qū)肉羊養(yǎng)殖效益低的原因主要在：妊娠早期胚胎丟失比例大，而且配種受胎率低和產(chǎn)羔率低，良種率低。本項(xiàng)目研究表明，利用Tris+糖的公羊精液稀釋液，可以將公羊精液在室溫條件下短時(shí)間保存，精子的活率還可以滿足人工授精的需要，有助于肉羊人工授精技術(shù)的推廣。通過(guò)采用本成果，可以增加良種肉羊的覆蓋率，提高肉羊的繁殖率，提高飼養(yǎng)肉羊的經(jīng)濟(jì)效益，降低肉羊?qū)︼暡蒿暳系南?，?duì)環(huán)境保護(hù)也起到一定的作用。不僅可以應(yīng)用于山區(qū)的肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)，而且還可以廣泛應(yīng)用于平原和牧區(qū)的肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)，應(yīng)用范圍廣泛。如果采用本項(xiàng)目的綿羊精液稀釋液的理想配方，再加上推廣本項(xiàng)目制定的肉羊繁殖技術(shù)市級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，可以提高受胎率10.77%?？傊摮晒蓱?yīng)用的市場(chǎng)規(guī)模巨大，這需要引起相關(guān)肉羊養(yǎng)殖公司的足夠重視，同時(shí)還需要投入一定的人力和物力，使本成果在生產(chǎn)中發(fā)揮作用，提高肉羊養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。

    目前，該成果已經(jīng)在在太行山區(qū)和周邊地區(qū)進(jìn)行了應(yīng)用，但是推廣該成果需要一定的前期工作，如配種人員的技能培訓(xùn)、熟練度培訓(xùn)、責(zé)任心的培養(yǎng)。此外，還要肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)的配合，包括飼料要營(yíng)養(yǎng)均衡，母羊的體況控制，發(fā)情母羊的及時(shí)配種等等。只有這樣，才能達(dá)到理想的受配率和妊娠率。為了解決人力財(cái)力投入問(wèn)題，可以和肉羊配種服務(wù)公司合作，讓肉羊配種服務(wù)公司在進(jìn)行配種服務(wù)時(shí)就應(yīng)用該成果，使本成果在生產(chǎn)中發(fā)揮作用，提高肉羊養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益。也可以和地方業(yè)務(wù)主管部門(mén)合作，將農(nóng)產(chǎn)品的良種補(bǔ)貼，直接補(bǔ)資金，改為技術(shù)和相關(guān)產(chǎn)品的補(bǔ)貼，這樣可以促進(jìn)該成果的轉(zhuǎn)化。另外，還可以和河北工程大學(xué)生命學(xué)院或邯鄲市農(nóng)業(yè)專(zhuān)科學(xué)校高校合作，高校教師帶領(lǐng)學(xué)生真正下到基層，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)學(xué)研的結(jié)合。

    本項(xiàng)目的研究成果不僅有利于解釋肉羊妊娠免疫抑制機(jī)制形成和抗黃體溶解機(jī)制形成的原理，對(duì)肉羊妊娠免疫抑制和抗黃體溶解機(jī)制研究具有一定的推動(dòng)作用，同時(shí)對(duì)人類(lèi)相關(guān)方面的研究也具有借鑒作用。目前該成果雖然還不能完全用于商業(yè)應(yīng)用，但是本成果研發(fā)Tris+糖的精液稀釋液，自2016年10月至2018年6月期間，采用試驗(yàn)推廣相結(jié)合的方法，在太行山區(qū)和周邊地區(qū)應(yīng)用面積達(dá)到肉羊1萬(wàn)余只；提高肉羊人工授精妊娠率8%，提高受胎率10.77%，增加產(chǎn)羔率10%。計(jì)劃首先在3個(gè)以上肉羊養(yǎng)殖場(chǎng)推廣應(yīng)用該技術(shù)。此外，本項(xiàng)目還制定了肉羊繁殖標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)規(guī)范，有利于規(guī)范肉羊繁殖人員的技術(shù)操作，進(jìn)一步提高肉羊繁殖率，杜絕人為因素的影響，更好地服務(wù)于肉羊生產(chǎn)。但目前由于資金不足，該成果推廣應(yīng)用受到影響。建議加強(qiáng)與企業(yè)合作，實(shí)現(xiàn)成果的進(jìn)一步推廣應(yīng)用。